阴道卷曲乳杆菌Lcr-MH175改善宫腔粘连的临床及机制研究
发布时间：
2023-06-16 17:09
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88805tccn新蒲京app一直重视产学研结合的项目研发模式，推行建立以企业为主体、科研院所、高校为支撑、市场为导向、产品为核心、产学研相结合的创新体系，并与南昌大学陈廷涛研究员携手，基于培养组学、科学循证和产业转化的研发思维，立足产学研一体化平台建设，经过长期基础理论与应用技术创新研究，丰富了益生菌行业领域菌种资源同时对其医学研究内容进行循证，成功将益生菌从菌株筛选和功能评价的基础研究阶段逐步延伸到重大疾病的辅助治疗与生殖健康等大健康领域。
2023年
88805tccn新蒲京app与南昌大学陈廷涛团队再度携手国家发明专利
“一株卷曲乳杆菌在制备治疗宫腔粘连药物中的应用”
专利号：ZL 2022 1 1307125.X
菌株名称：卷曲乳杆菌Lcr-MH175
拉丁名称：Lactobacillus crispatus Lcr-MH175
保藏编号：CGMCC NO.15938
并在期刊BMC Microbiology（Q2/中科院3区，IF2021=4.465）发表题为“Improvement of vaginal probiotics Lactobacillus crispatus on intrauterine adhesion in mice model and in clinical practice”的研究论文。利用卷曲乳酸杆菌开展了一项基础和临床相结合的研究，为宫腔粘连术后复发提供了一种新的方法。
原文地址：https://bmcmicrobiol.biomedcentral.com/articles/10.1186/s12866-023-02823-y
卷曲乳酸杆菌是革兰氏阳性细菌， 为阴道常见益生菌之一， 在阴道内可以通过产生酸性物质、过氧化氢、抑菌素等维持阴道微生态健康， 对阴道炎常见病原菌比如白假丝酵母菌、乙型溶血性链球菌等具有良好的抑制效果。此外， 该菌具有良好的抗氧化性，且可大量粘附于宫颈 Hela 细胞，并可有效阻止机会致病菌对 Hela 细胞的定植。
宫腔粘连（IUA）是由手术操作、感染和炎症等原因导致子宫内膜修复受损，宫腔部分或完全粘连。宫腔镜下宫腔粘连分离术（TCRA）是IUA首选诊治方法，然术后再粘连率高达62.5%。目前，虽有多种辅助治疗方法用于防止TCRA术后粘连复发，但疗效不佳，因此急需探索出一种更好的方法来解决TCRA术后粘连复发问题。在前期研究发现，阴道菌群失调宫腔粘连密切相关。因此，我们猜想通过阴道补充卷曲乳酸杆菌（Lactobacillus crispatus，L. crispatus）恢复阴道菌群，可能抑制宫腔炎症和纤维化，从而改善TCRA术后粘连复发情况。
研究者通过机械损伤构建IUA小鼠模型，术后阴道补充L. crispatus评估该菌对改善宫腔粘连复发的积极作用。并采用组织病理学、蛋白质免疫印记（Western blotting）、实时荧光定量（RT-PCR）、酶联免疫吸附测定（ELISA）和16S rRNA等方法，分析L. crispatus对小鼠宫腔炎症水平、纤维化程度和阴道微生物群变化的影响。研究结果表明，L. crispatus通过TGF-β1/Smads和NF-κB信号通路显著降低了小鼠宫腔炎症水平和纤维化程度，小鼠血清和子宫组织中的促炎因子IL-1β和TNF-α显著下降。同时，增加阴道有益菌的相对丰度、降低阴道致病菌的丰度，恢复了阴道微生物群平衡（图1所示）。
图1 16S rRNA高通量测序结果图（动物研究）
研究者进一步在临床上开展一项随机对照实验（图2所示），招募了125名IUA患者作为研究对象，根据纳入、排除标准确定IUA模型组（I组）。I组实行TCRA手术后再随机等分为雌激素治疗组（E组）及L. crispatus干预组（L组）。E组：术后连续口服戊酸雌二醇21天，每天剂量4 mg，后加用醋酸孕酮10 mg，持续7天；L组：术后每晚阴道使用L. crispatus冻干粉胶囊（1×108 CFU/粒），持续14天。E组及L组患者在下一月经周期干净3-7天复查宫腔镜评估粘连改善情况。收集I组、E组和L组手术消毒前的阴道分泌物利用16S rRNA高通量测序分析各组阴道微生物组成差异。
图2 临床研究具体流程图
结果如图3所示，宫腔粘连I组与健康女性C组阴道菌群在α-多样性和β-多样性存在明显差异，卷曲乳酸杆菌干预的L组比雌激素治疗的E组更能将IUA患者阴道菌群恢复至健康水平，改善TCRA术后IUA复发情况效果更好。在门水平上，与C组相比，I组有益菌厚壁菌门（Firmicutes）减少（93.52%~76.88%，p < 0.05），拟杆菌门增加（0.09%~4.37%，p > 0.05）。雌激素治疗后，Firmicutes增加（76.88%~85.99%，p > 0.05），拟杆菌门（Bacteroidetes）减少（4.37%~2.05%，p > 0.05）。在L组，这一趋势更为明显（76.88%~89.35%，P > 0.05；4.37%~0.31%，P > 0.05）。在属水平上，与C组相比，I组乳酸杆菌（Lactobacillus）相对丰度显著降低（93.14%~62.19%，P < 0.01），加德纳菌（Gardnerella）相对丰度显著增加（0.24%~2.27%，P > 0.05）。雌激素治疗后，E组和L组Lactobacillus的相对丰度均有所增加（62.19%~83.18%，p < 0.05；62.19%~88.11%，p < 0.01）。E组和L组的Gardnerella相对丰度则表现为不同趋势（2.27%~5.83%，p > 0.05；2.27%~0.19%，p > 0.05）。本研究为TCRA术后IUA复发提供了新的预防措施，也为L. crispatus制剂的临床转化提供了研究基础。
图3 16S rRNA高通量测序结果图（临床研究）
其他